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NEWS文献速递|不朽情缘MG跨物种诱导系统增强细菌蛋白表达与代谢途径调控探索
来源:龙光佳 日期:2025-03-01江南大学刘龙教授及其团队近期在《Nucleic Acids Research》(影响因子166)上发表了题为《Across-species inducible system for enhanced protein expression and multiplexed metabolic pathway fine-tuning in bacteria》的文章。在这项研究中,不朽情缘MG的产品StarLighter Hot Start Taq Pro PCR Mix(FS-P5001,StarLighter热启动Taq Pro PCR预混液)发挥了积极作用,助力该项目的成功展开!
诱导系统在代谢工程和合成生物医学领域扮演着关键角色。这些系统通过添加诱导剂,能够精准控制基因的激活与抑制,相较于传统的组成型表达系统,诱导系统能够显著降低宿主细胞的代谢负担,并提升重组蛋白、平台化学品及生物聚合物等多种工业产品的产量。
然而,大多数现有的诱导系统具有菌株特异性,从而限制了其在跨菌株比较分析和应用中的有效性。该研究提出了一种新型的跨物种诱导系统,旨在增强细菌中的蛋白质表达能力,同时实现对多重代谢途径的精细调控。研究开发了两种重构诱导系统(PphlF3R1和无水四环素诱导系统Ptet2R2*),并在三种模式微生物(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌)中进行了验证。
为此,研究人员选择了九个已有的诱导系统,包括IPTG和木糖诱导系统。通过理性设计与随机突变,重新构建这些系统以便在不同菌株中有效表达。同时,研究还引入了突变抑制子表达文库,进一步优化了诱导系统,减少了泄漏表达的现象。通过将诱导系统放置于质粒和基因组中,研究检测了这些系统在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌中的表现。
最终,成功构建了两个跨物种诱导系统:DAPG诱导系统PphlF3R1及无水四环素(aTc)诱导系统Ptet2R2*。经过优化,P_tet2R2* 在所有三种菌株中展现出了低泄漏、宽动态范围、充足的表达强度和适当的敏感性。这一系统被用于有效调控各种报告蛋白(如sfGFP、mCherry和mScarlet3)及相关基因簇(如crtEIB、crtEIBY和vioABCDE)的表达。
此外,基于T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)和dCas12a的单输入基因回路也在研究中被开发,以实现同时激活和抑制特定基因的表达。这项研究的意义在于提供了一种跨物种的诱导系统,对比较不同菌株间的基因表达和功能具有重要的应用价值,尤其是在合成生物医学和代谢工程构建复杂生物系统的背景下。借助这种系统,研究人员能够更有效地控制蛋白质表达与代谢路径调控,从而提升生物合成的整体效率与产量。strong不朽情缘MG将继续致力于推动生物医学领域的创新与发展,助力科学研究更进一步。
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